發布日期：2022-05-30 點擊率：42
液相色譜儀系統由儲液器、泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。
儲液器中的流動相被高壓泵打入系統，樣品溶液經進樣器進入流動相；
被流動相載入色譜柱（固定相）內，由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數；
在兩相中作相對運動時，經過反復多次的吸附-解吸的分配過程，各組分在移動速度上產生較大的差別；
被分離成單個組分依次從柱內流出，通過檢測器時，樣品濃度被轉換成電信號傳送到記錄儀；
數據以圖譜形式打印出來高效液相色譜儀主要有進樣系統、輸液系統、分離系統、檢測系統和數據處理系統；
下面將分別敘述其各自的組成與特點。
進樣系統
一般采用隔膜注射進樣器或高壓進樣間完成進樣操作，進樣量是恒定的。
這對提高分析樣品的重復性是有益的。
輸液系統
該系統包括高壓泵、流動相貯存器和梯度儀三部分。
高壓泵的一般壓強為47～44X10Pa，流速可調且穩定，當高壓流動相通過層析柱時；
可降低樣品在柱中的擴散效應，可加快其在柱中的移動速度；
這對提高分辨率、回收樣品、保持樣品的生物活性等都是有利的。
流動相貯存器和梯度儀，可使流動相隨固定相和樣品的性質而改變；
包括改變洗脫液的極性、離子強度、PH值，或改用競爭性抑制劑或變性劑等。
這就可使各種物質（即使僅有一個基團的差別或是同分異構體）都能獲得有效分離。
分離系統
該系統包括色譜柱、連接管和恒溫器等。
色譜柱一般長度為10～50cm（需要兩根連用時，可在二者之間加一連接管）；
內徑為2～5mm，由"優質不銹鋼或厚壁玻璃管或鈦合金等材料制成；
住內裝有直徑為5～10μm粒度的固定相（由基質和固定液構成）。
固定相中的基質是由機械強度高的樹脂或硅膠構成；
它們都有惰性（如硅膠表面的硅酸基因基本已除去）、多孔性（孔徑可達1000?）和比表面積大的特點；
加之其表面經過機械涂漬（與氣相色譜中固定相的制備一樣）；
或者用化學法偶聯各種基因（如磷酸基、季胺基、羥甲基、苯基、氨基或各種長度碳鏈的烷基等）或配體的有機化合物。
因此，這類固定相對結構不同的物質有良好的選擇性。
例如，在多孔性硅膠表面偶聯豌豆凝集素（PSA）后，就可以把成纖維細胞中的一種糖蛋白分離出來。
另外，固定相基質粒小，柱床極易達到均勻、致密狀態，極易降低渦流擴散效應。
基質粒度小，微孔淺，樣品在微孔區內傳質短。這些對縮小譜帶寬度、提高分辨率是有益的。
根據柱效理論分析，基質粒度小，塔板理論數N就越大。
這也進一步證明基質粒度小，會提高分辨率的道理。
再者，高效液相色譜的恒溫器可使溫度從室溫調到60C；
通過改善傳質速度，縮短分析時間，就可增加層析柱的效率。
標簽: 液相色譜儀
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