可見分光光度計，是用于檢測和跟蹤記錄被測物質(zhì)對可見光的吸光度并進行定量分析的儀器設(shè)備。
工作原理
溶液中的物質(zhì)在可見光的照射激發(fā)下,產(chǎn)生對光吸收的效應(yīng),這種吸收是具有選擇性的。各種不同的物質(zhì)都有各自的吸收光譜,因此當(dāng)某單色光通過溶液時,其能量就會被吸收而減弱,光能量減弱的程度和物質(zhì)的濃度有一定的比例關(guān)系,即符合朗伯一比爾定律(見圖3-10)。
液的光程長不變時,透過光是根據(jù)溶液的濃度而變化的,可見分光光度計的基本原理是根據(jù)上述物理光學(xué)現(xiàn)象而設(shè)計的。
儀器的結(jié)構(gòu)
可見分光光度計的種類和型號甚多。實驗化學(xué)中常用的有72型和722型可見分光光度計,現(xiàn)分別簡要介紹如下。
1.72型分光光度計的結(jié)構(gòu)
72型分光光度計是由磁飽和穩(wěn)壓器、單色器和檢流計三大部分組成。使用時,應(yīng)先把這三部分用導(dǎo)線按圖3-11接好。
將單色器與穩(wěn)壓器的輸出接線柱5.5V或10V連接,再按照導(dǎo)電片上套管的顏色,把單色器與檢流計連接,紅色套管的導(dǎo)電片接在“十”號處,綠色套管的導(dǎo)電片接“一”號處,第三個導(dǎo)電片接地線。穩(wěn)壓器和檢流計分別接220V電源。
2.722型光棚-分光光度計的結(jié)構(gòu)
722型光柵分光光度計,采用自準(zhǔn)式色散系統(tǒng)和單光束結(jié)構(gòu),色散元件為衍射光柵,使用波長為330~800nm數(shù)字顯示讀數(shù)還可以直接測定溶液的濃度。其外形如圖3-12所示。
儀器的使用
1.72型分光光度計的使用方法
(1)接通電源前,應(yīng)先使穩(wěn)壓器、檢流計和單色器的電源開關(guān)均處“關(guān)”的位置。光量調(diào)節(jié)器逆時針轉(zhuǎn)至最小位置,單色器光閘門撥到黑點,然后把穩(wěn)壓器和檢流計接上220V交流電源。
(2)將檢流計電源開關(guān)打開,分擋開關(guān)由“斷”撥至“直接”或“X1”檔,指示光點出現(xiàn)在標(biāo)尺上,用零位調(diào)節(jié)器將光標(biāo)線準(zhǔn)確地調(diào)至透光度標(biāo)尺的“0”點上。
(3)打開穩(wěn)壓器和單色器的電源開關(guān),把光閘門撥到“紅”點上,再沿順時針方向旋轉(zhuǎn)光亮調(diào)節(jié)器,使檢流計的指示光標(biāo)線到達(dá)標(biāo)尺上透光度100%處附近,預(yù)熱10min后,待光標(biāo)穩(wěn)定后再開始使用。(4)把波長調(diào)節(jié)器調(diào)節(jié)到需要的波長處。
(5)將單色器的光閘門撥到“黑”點處,再一次核對檢流計零位(即透光度為“0”處)。
(6)將盛空白溶液的比色皿放人比色皿架第一格中,其余=格放入待測溶液,蓋上暗箱蓋,將空白溶液推入光路(拉桿推到底)。把光閘門撥到“紅”點上,輕輕調(diào)節(jié)光量調(diào)節(jié)器,把光標(biāo)線準(zhǔn)確地調(diào)至透光度“100”的讀數(shù)上。
(7)把拉桿抽出一格,使有色溶液進入光路,光標(biāo)線所指的A值就是該溶液的吸光度,再依次測定其他溶液。
(8)測定完畢,取出比色皿把溶液倒掉,用蒸餾水沖洗干凈,吸干,放回比色皿盒子內(nèi)。全部旋鈕和開關(guān)恢復(fù)到使用前的狀態(tài),切斷電源,把儀器罩好。
注意:
1)在接通電源之前,應(yīng)檢查各個調(diào)節(jié)旋'題是否均在起始位置,然后再打開電源開關(guān)。儀器停止工作時,必須把開關(guān)放在“關(guān)”上再切斷電源。
2)只要空白溶液的透光度能調(diào)到“100”,單色器的電源電壓應(yīng)用5.5V,不用10V。這主要是延長光源燈的壽命,降低單色器的溫度。
3)檢流計背面有兩個電源插孔,分別標(biāo)有“220V”和“6V”。若用220V交流電源,則導(dǎo)線插頭應(yīng)橋入“220V”孔內(nèi),者用6V直流電源,則導(dǎo)線插頭應(yīng)插入“6V”孔內(nèi),不能插錯。否則將把儀器燒壞。
4)在儀器使用過程中,應(yīng)注意保護光電池,選免長時·間照射而疲勞。當(dāng)取換溶液和記錄讀數(shù)后.應(yīng)及時將光聞門拔到“黑”點,切斷入射光。
5)應(yīng)注意保護比色皿的透光面的光潔。使用時只能用手拿毛玻璃面,勿拿透光面。據(jù)拭整外溶液時只能用鏡頭紙。
6)比色皿盛放溶液不能超過其高度的4/5,以免溶液溢入機件內(nèi)部。
2.722型光柵分光光度計使用方法
(1)在接通電源前,應(yīng)對儀器的安全性進行檢査,電源線接線應(yīng)牢固,接地線通地要良好,各個調(diào)節(jié)旋鈕的起始位置應(yīng)該正確,然后再接通電源。
(2)將靈敏度派或調(diào)至“1”擋(放6倍率最小)。調(diào)波長調(diào)節(jié)器至所需波長。
(3)開啟電源開關(guān),指示燈亮,選擇開關(guān)置于''T”,調(diào)節(jié)透光度''100%”旋鈕,使數(shù)字顯示100.0”左右,預(yù)熱20min。
(4)打開吸收地暗室蓋(光門自動關(guān)閉),調(diào)節(jié)“0”旋鈕,使數(shù)字顯示為“00.0”,蓋上吸收地蓋,將參比溶液置于光路,使光電管受光,調(diào)節(jié)透光度“100%”旋鈕,使數(shù)字顯示為“100.0”。
(5)如果顯示不到“100”,則可適當(dāng)增加電流放大器靈敏度擋數(shù),但應(yīng)盡可能使用低擋數(shù),這樣儀器將有更高的穩(wěn)定性。當(dāng)改變靈敏度后必須按重新校正“0”和“100”。
(6)按(4)連續(xù)幾次調(diào)整“00.0”和“100”后,將選擇開關(guān)置于“A”,調(diào)節(jié)吸光度調(diào)零旋鈕,使數(shù)字顯示為“.000”。然后將待測溶液推入光路,顯示值即為待測樣品的吸光度值A(chǔ)。
(7)濃度c的測量。選擇開關(guān)由“A”旋至“c”,將標(biāo)準(zhǔn)溶液推入光路,調(diào)節(jié)濃度旋鈕。使得數(shù)字顯示值為已知標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度數(shù)值。將待測樣晶溶液推人光路,即可讀出待測樣品的濃度值。
(8)如果大幅度改變測試波長時,在調(diào)整“00.0”和“100”后稍等片刻(因光能量變化急劇,光電管受光后響應(yīng)緩慢,需一段光響應(yīng)平衡時間),當(dāng)穩(wěn)定后,重新調(diào)整“00·0”和“100”即可工作。
注意:
1)使用前,使用者應(yīng)該首先了解本儀器的結(jié)構(gòu)和原理,以及各個旋鈕之功能。
2)儀器接地要良好,否則顯示數(shù)字不穩(wěn)定。
3)儀器左側(cè)下角有一只干操劑筒,應(yīng)保持其干燥,發(fā)現(xiàn)干操劑變色應(yīng)立即更新或烘干后再用。
4)當(dāng)儀器停止工作時,切斷電源,電源開關(guān)同時切斷,并章好儀器。
以上為筆者對可見分光光度計的工作原理、結(jié)構(gòu)外型及使用方法進行相關(guān)介紹，希望可以提供行業(yè)相關(guān)試用人員一些參考借鑒。
